NADH FLIM 的基础是分离 NAD(P)H 结合和非结合部分的荧光衰减成分。这些成分的振幅和衰减时间可用于获取细胞或组织代谢状态的信息。通过使用超快的 HPM-100-06 和 HPM-100-07 混合探测器,衰变成分的分离以及振幅和寿命的准确性得到了大幅提高。与 SPC-150N 和 SPC-150NX TCSPC 模块组合使用时,IRF 宽度小于 20 ps,参见 bh news 2017/04。如此快的 IRF 不会干扰荧光衰减。数据分析中通常的去卷积过程实际上变成了简单的曲线拟合,并以前所未有的精度获得衰变参数。 下图是双指数拟合的振幅加权寿命图像,上排。右侧显示的是所选 9×9 像素光斑的衰变数据。由于探测器-TCSPC 组合的快速反应,荧光的上升几乎是瞬间发生的。第二行显示了振幅比 a1/a2(非结合/结合比)以及快速衰减(t1,非结合 NADH)和慢速衰减(t2,结合 NADH)的图像。
详情请参阅应用说明 “超快检测器改进了 NAD(P)H FLIM“。