DCS-120 超级 MPC FLIM 系统

多光子/共焦 FLIM 可调式激发系统

  • 多光子/单光子组合系统的可调谐激发
  • 利用宽调谐超快激光器(OPO、Ti:Sa)进行多光子激发
  • 利用宽调谐飞秒激光的 SHG 进行单光子激发
  • 用于多光子操作的 NDD 探测器
  • 用于单光子操作的共焦探测器
  • 用于多光子和共焦操作的低于 20 ps FWHM 时间分辨率
  • 两个完全并行的SPC-180NX检测通道
  • 高灵敏度、高光子效率、快速采集
  • SPCImage NG精确数据分析

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规格

选定规格

原理

从紫外到近红外的窄带可调激发,快速振镜激光扫描,去扫描共焦检测(DC,共焦模式),非扫描检测(NDD,多光子模式),以及 bh 的多维 TCSPC FLIM 技术

激发

  • 多光子模式:可调 Ti:Sa fs 脉冲激发,在 680 纳米到 1300 纳米范围内选择性激发
  • 共焦模式:多光子激光的窄带选择性倍频,覆盖 400 纳米至 640 纳米的紫外和可见光范围。皮秒持续时间激光脉冲光纤传送到显微镜,以获得最佳共焦性能。

扫描速率、像素停留时间

低至约 1 μs/pixel

一般操作模式

TCSPC FLIM:

  • 2 个(多)光谱或偏振通道
  • 时间序列、Z-堆栈、马赛克(x、y、z、时间)
  • FLITS(荧光寿命-瞬态扫描)
  • 与 FLIM 同时进行的 PLIM(磷光寿命成像)、
  • 光子相关:FCS、FCCS、门控 FCS
  • 单点荧光和磷光衰减

扫描头

光学原理

快速振镜激光扫描

激光输入

两个独立输入,光纤耦合(紫外 + 可见光)和自由光束(近红外)

光学激光功率控制

连续 ND 滤光片轮控制

共焦检测

探测器输出

两个共焦检测探测器直接连接到扫描头上。

主要分光镜型号

无需对准的可交换式分色镜:提供长通、多波段、宽波段和多光子选项

二次分光镜轮

三个二向色分光镜,偏振分光镜,100% 到通道 1,100% 到通道 2

针孔

每个通道都有独立的针孔轮

针孔对准

电子,通过压电微动平台

针孔尺寸

11 个针孔,从约 0.5 到 10 AU

发射滤波器

每个通道串联两个滤光片滑块

多光子检测

非扫描 (NDD) 探测器

连接到显微镜后部的外荧光端口,二向色镜和带通滤光片插入显微镜标准滤光片立方体中。

NDD 探测器光保护

快速光学快门,具有光量过载保护功能。

扫描控制

原理

硬件控制精确激光扫描,快速回扫,实现快速采集

图像尺寸

帧扫描 16 x 16 至 4096 x 4096 像素,行扫描 16 至 4096 像素

X 扫描

连续扫描或逐个像素扫描、

Y 扫描

逐行扫描

电子激光功率控制

软件控制带有模拟调制输入的激光器

光束消隐

回扫期间和扫描停止时需要软件控制激光功率。

帧频/扫描速度

自动选择最快速率或手动选择

扫描区域定义

交互式扫描区域选择、硬件缩放 + 偏移。

快速预览功能

光束驻留功能

是,交互式测量点选择。

TCSPC 系统

TCSPC / FLIM 模块

SPC-180NX

SPC-QC-104

并行 TCSPC / FLIM 通道数

典型值2,最多4

典型值2,最多3

电气时间分辨率

1.6 ps RMS / 3.5 ps FWHM

16 ps RMS / <39 ps FWHM

定时精度 /

1.1 ps

11 ps

最小时间通道宽度

405 fs

4 ps

饱和计数率

12 MHz

40 MHz,活动通道共享。

记录多波长数据

通过路由功能在 16 个通道中同时进行

TCSPC 系统的运行模式

  • 硬件预分析成像
  • 光子事件流(FIFO)成像
  • 相关点测量、长时间尺度强度 (MCS)
  • 马赛克成像、时间序列成像 多探测器操作、循环和重复功能、自动保存功能

软件

数据采集软件

bh SPCM、用于集成外部设备的 bh LabVIEW

扫描仪控制软件

集成在 SPCM 中,bh LabVIEW 用于集成外部设备

操作系统

Windows 10 / 11 64 位

数据分析软件

bh SPCImage NG

数据分析原理

MLE 拟合(GPU 辅助处理)

函数模型

  • IRF 卷积单、双或三分量指数衰变
  • 可选择考虑不完全衰减
  • 偏移分量模型

IRF 建模

拟合衰变数据的合成 IRF 函数、从数据中自动提取 IRF 或测量 IRF

激发源

共焦 FLIM

对多光子激光器进行窄带选择性倍频,以覆盖 400 nm - 640 nm 的紫外线和可见光范围。皮秒持续时间激光脉冲光纤传送到显微镜,以获得最佳共焦性能

多光子 FLIM

可调 Ti:Sa fs 脉冲激发,在 680 纳米到 1300 纳米范围内选择性激发。

探测器

共焦检测器

直接耦合到扫描头

NDD 探测器

NDD 探测器,直接耦合到显微镜的后端口。检测器连接组件包括用于激光阻挡、二色镜和带通滤光片的空间。

标准探测器

HPM-100-40 混合探测器,带 GaAsP 阴极,波长 250 至 720 nm,最适合与 ns 寿命染料一起使用。

选购件

HPM-100-06 检测器,FWHM IRF 宽度小于 20 ps,波长 220 至 650 nm,最适用于 ps 寿命的自发荧光研究,仅用于共焦检测。

可选

HPM-100-50 检测器,波长 400 至 900 nm,最适用于长波长荧光。

可选

MW-FLIM GaAsP 多波长探测器

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文件

The bh TCSPC Handbook
10th edition, September 2023

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