- 宏观物体的 FLIM
- 代谢成像
- 扫描区域直径达 15 毫米
- 紫外线增强光学器件
- 两个完全并行的 TCSPC FLIM 通道
- 通过bh 的多维 TCSPC 流程进行记录
- 提供快速 FLIM
- 紧凑型 bhSimple-Tau或Power-TauTCSPC 系统
- 通过快速振镜扫描
- 通过二向色或偏振分光镜进行通道分离
- 可单独选择的针孔和滤光片
- 一个或两个BDL-SMN或BDS-SMps 二极管激光器
- 通过带 AOTF 的超连续激光器进行可调激发
- 两个完全平行的共焦检测通道
- 两个HPM-100-40 GaAsP混合探测器
- 可选:两个HPM-100-06混合探测器,IRF 宽度 <20 ps FWHM
- 可选:用于近红外 FLIM 的HPM-100-50混合探测器
- 可选:两个 HPM-100-06 混合探测器,IRF 宽度 <20 ps FWHM多波长 FLIM
- 卓越的时间分辨率:电 IRF 宽度 3.5 ps FWHM
- 时间通道宽度低至 405 fs
- 百万像素 FLIM,高达 2048 x 2048 像素,256 个时间通道
- 同时 FLIM/PLIM
- 宽带版本,与可调激光器兼容
- 电子针孔对准
- 可选:通过电动样品台进行空间镶嵌 FLIM
说明
DCS-120 MACRO 型 DCS 系统可直接扫描扫描仪焦平面内的物体。可对 15 毫米大小的物体进行成像,分辨率约为 25 微米。与DCS-120 共焦 FLIM系统一样,DCS-120MACRO 使用ps 二极管激光器激发、振镜快速扫描、共焦检测和bh 的多维 TCSPC 技术进行 FLIM,以高时间分辨率、高空间分辨率和高灵敏度记录荧光寿命图像。DCS-120 MACRO 系统具有快速光束扫描和高灵敏度的特点,可用于活体成像。DCS-120 的功能包括在两个完全平行的波长通道中同时记录 FLIM 或稳态荧光图像、激光波长复用、时间序列 FLIM、时间序列记录、Z 叠加 FLIM、磷光寿命成像(PLIM)、荧光寿命瞬态扫描(FLITS)和 FCS 记录。其应用重点是荧光团与其分子环境的相互作用引起的寿命变化。典型的应用包括离子浓度测量、FRET 实验、代谢成像、快速生理效应成像和植物生理学。
规格
请参阅:
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文件
手册
- DCS-120 Confocal and Multiphoton FLIM Systems – User Handbook 9th ed. 2021
- DCS-120 Confocal and Multiphoton FLIM Systems – Overview Brochure
- FLIM Systems for Laser Scanning Microscopes – Overview Brochure
- Bigger and Better Photons: The Road to Great FLIM Results
- SPCImage NG – Overview Brochure
- The bh FLIM Technique – More than Lifetime Imaging
bh FLIM 系统的应用领域是分子成像。典型的应用包括离子浓度、pH 值或局部粘度成像,通过 FRET 进行蛋白质相互作用实验,以及通过 NADH 和 FAD 的荧光衰减结合氧气测量进行代谢成像。在这些应用中,bh FLIM 系统具有高灵敏度、高时间分辨率、高定时稳定性,并能将多指数衰减曲线分解为各个组成部分。其他优势还包括能够记录毫秒级的快速生理效应 FLIM,以及同时记录多个激发和发射波长。
原则
DCS-120 MACRO 系统的原理
DCS-120 MACRO 系统直接在 DCS-120 共焦扫描头的主像平面上扫描宏观样品。原理如下图所示。
两束不同波长的激光通过单模光纤注入扫描仪。组合激光束由两个快速移动的振镜扫描。扫描透镜将激光束聚焦到扫描仪前方的一个图像平面上。在扫描物体时,该平面与样品表面重合。当振镜改变光束角度时,激光焦点就会在样品上扫描。样品中激发的荧光被扫描透镜准直后,由振镜去扫描,并通过主二向分光镜与激发光分离。荧光光束进一步被分成两个光谱或偏振分量,并聚焦到针孔中。通过针孔的光被送入HPM-100-40 或 HPM-100-06 混合探测器。在最大扫描振幅(最小变焦)下,系统扫描的图像区域约为 15 x 15 毫米。DCS MACRO 的空间分辨率约为 20 微米,可以获得清晰度极高的图像。为了充分利用扫描仪的分辨率,FLIM 数据的记录像素可达 20248 x 2048。时间通道的数量可从 64 到 4096 之间选择,建议选择 1024。下图是一个示例。
FLIM 数据采集
FLIM 数据采集采用 bh 的多维 TCSPC 流程。它基于单个荧光光子的检测、激光脉冲周期内光子时间的确定、光子检测时激光束在扫描区域内的位置,以及扫描坐标和激光脉冲周期内时间的三维光子分布。另请参阅DCS-120 共焦 FLIM 系统原理。
详情请参阅《DCS-120 共焦和多光子 FLIM 系统手册》和《bh TCSPC 手册》。